今日，Broad研究所的著名學者張鋒教授和合作伙伴一起，公布了他們進一步改良的基于CRISPR技術的新冠病毒簡易檢測流程。這一流程被稱為STOPCovid.V2，此前，張鋒團隊和其合作伙伴已經(jīng)公布了稱為STOPCovid的簡易新冠病毒檢測流程，這一流程不需要從患者樣本中純化RNA，并且將檢測新冠病毒所需的化學反應步驟在一個試管中完成。

2.0版的STOPCovid在原有檢測的基礎上更進一步，在樣本制備的過程中通過加入磁珠富集樣本中的RNA，從而通過提高PCR反應的起始RNA數(shù)量，進一步提高了STOPCovid.V2的檢測靈敏度。

在最初的STOPCovid檢測流程中，張鋒團隊將擴增RNA數(shù)目的等溫PCR步驟和使用Cas酶檢測新冠病毒特定序列的化學反應合并在同一個試管中進行。這一檢測步驟不需要復雜儀器，只需要在60攝氏度的恒溫反應，就可以通過側(cè)流試紙讀出檢測結(jié)果。然而，在進一步檢測中，研究人員發(fā)現(xiàn)，這一簡易版流程只能發(fā)現(xiàn)60.5%傳統(tǒng)RT-PCR檢測出的陽性患者。

為了提高檢測的靈敏度，STOPCovid.v2的流程中加入了通過磁珠富集鼻咽拭子中新冠病毒RNA的步驟，使用普通實驗室中用于富集RNA的磁珠，研究人員可以收集鼻咽拭子中包含的所有病毒RNA作為反應的起始材料，而且研究人員同時精簡了磁珠富集RNA的操作步驟，去除了乙醇清洗和洗脫過程，讓整個RNA富集過程不超過15分鐘。

▲STOPCovid.V2的操作流程（圖片來源：參考資料[1]）

在華盛頓大學進行的一項設盲檢測中，研究人員檢測了STOPCovid.V2檢驗202個新冠病毒陽性和200個新冠病毒陰性鼻咽拭子樣本的結(jié)果。研究人員發(fā)現(xiàn)，STOPCovid.V2能夠達到93.1%的靈敏度和98.5%的特異性。陽性樣本只需15-45分鐘就能獲得結(jié)果。

▲STOPCovid.V2的檢測結(jié)果，B：新冠病毒陽性樣本；C：新冠病毒陰性樣本，紅色虛線為判斷樣本為陽性還是陰性的閾值（圖片來源：參考資料[1]）

研究人員在文章中表示，這一簡化版的STOPCovid.V2流程適于沒有復雜儀器的臨床實驗室使用。同時，研究人員還開發(fā)了一款智能手機APP，幫助檢測人員對側(cè)流試紙的結(jié)果進行解讀。

參考資料：

[1] Joung et al, (2020). Detection of SARS-CoV-2 with SHERLOCK One-Pot Testing. NEJM, DOI: 10.1056/NEJMc2026172